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北京金英赛得科技有限公司

Beijing Insect Biotech Co., Ltd.

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饲料中添加蜘蛛酶对凡纳滨对虾生长性能、非特异性免疫能力和养殖水环境的影响

发布时间:2014-05-06 14:44:00 点击:


饲料中添加蜘蛛酶对凡纳滨对虾生长性能、非特异性免疫能力和养殖水环境的影响

谢骏,余德光,王广军,乌兰,胡朝莹,关胜军

(中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州 510380

 

摘要:经过60d的实验,结果表明:蜘蛛酶可以提高凡纳滨对虾的成活率,由对照组的82.33%提高到0.15%0.10%处理组的89.67%90.67%;蜘蛛酶还能显著提高每百尾对虾的日增重,0.15%0.10%处理组分别比对照组提高1.34g0.98gP<0.05);0.15%0.10%的蜘蛛酶处理组的饵料系数分别为1.35±0.081.47±0.15,分别比对照组降低了0.17P<0.05)和0.05P>0.05);试验结束时,各组水体中COD、亚硝酸氮、氨氮都有不同程度的增加,但蜘蛛酶处理组的这三项水化指标明显低于对照组;在饲料中添加蜘蛛酶,还可以提高凡纳滨对虾血清中酸性磷酸酶活性和溶菌酶的活性,但对超氧化物歧化酶活性影响不显著。

关键词:蜘蛛酶,金属蛋白酶,凡纳滨对虾,生长,非特异性免疫

蜘蛛酶(Arazyme®)是从韩国Insect Biotech公司进口的利用现代生物技术研制开发的绿色饲料添加剂,其主要成分为高效蛋白酶。它蜘蛛(Nephila Clavata消化道内的共生微生物(HY-3)所分泌的一种高活性金属蛋白酶, 其与目前市场上常用的蛋白酶相比除具有更强大的蛋白分解能力外,还具有耐受高温和高盐、较宽的pH值的特点,而且动物日粮中的大部分二价金属离子还可以使酶的活性提高2-4倍。另外,蜘蛛酶对各类炎症有明显的消炎作用这也是其与目前市面上的其它蛋白分酶的主要区别。

目前,对蜘蛛酶的研究主要集中在其对畜禽的消化率、生长性能、免疫力等方面,在水产动物上报道较少,目前也仅在对罗非鱼的生长性能、消化率和免疫能力进行过研究;而为了解蜘蛛酶在凡纳滨对虾(即南美白对虾)养殖中的效果,特进行本次试验:研究蜘蛛酶对南美白对虾生长、免疫指标以及养殖水体环境的影响。

1 材料和方法

1.1 蜘蛛酶

蜘蛛酶(水产用)由北京金英赛得科技有限公司提供。

1.2 试验地点及时间

试验在中国水产科学研究院珠江水产研究所内(广州)进行。生长试验从2006727日开始,至925日结束,共60d

1.3 试验条件

试验是在室外的水泥池(6.4×1.6米×1.2米)中进行,每个水泥池挂三个网箱,网箱规格2.0×1.0米×1.0米。每个网箱有效水体2.0×1.0米×0.8米。养殖用水为经沉淀过滤的池塘水,用海水晶将盐度调至1~2后开始试验。试验期间水温为25~30,试验整个过程连续24小时充气。

1.4 试验饲料

实验饲料由北京金英赛得科技有限公司委托湛江某虾饲料厂生产。实验组饲料中分别添加蜘蛛酶0.10%0.15%,对照组不添加蜘蛛酶。饲料中营养成分如下:粗蛋白40.0%,粗脂肪4.0%,粗灰分15.0%,水分12.0%,粗纤维5.0%,总磷:1.0%,钙4.0%。饲料加工条件见表1

1. 南美白对虾配合饲料加工条件

指标

数值

制粒温度

98-105

制粒时间

1h

粒径

0.18mm

1.5 试验虾苗

试验用凡纳滨对虾苗来自番禺养殖场,实验虾运回研究所后,暂养10d后挑选个体均匀一致和健康的虾用于本试验。

1.6实验设计

实验设计分三个浓度组,分别为含蜘蛛酶00.10%0.15%,每个浓度组设三个重复。每个网箱放100尾对虾苗,随机抽取20尾测量体长、体重,并把其作为试验虾的初始体长和体重(详见表2)。

2. 虾的平均放养规格(N=20

 

初始体长(cm

初始体重(g

对照组

3.03±0.41

0.36±0.15

0.10%

3.33±0.41

0.41±0.17

0.15%

2.97±0.51

0.38±0.14

1.7 日常管理

    试验期间投饲率为其体重的38%左右,每天分3次投喂,分别在80016002200,每半个月抽样测量对虾的体重体长,以调整日投喂量。具体根据虾的摄食情况进行调整。同时每天测定溶解氧(DO)、pH值,每10d测定一次化学耗氧量(COD)、氨(NH4-N)、亚硝酸盐(NO2-N)。

1.8非特异性免疫指标的测定

试验结束后,每个网箱随机抽取8尾虾,每个处理组共24尾,1ml的一次性无菌注射器从虾第五步足基部抽取血淋巴,每尾约0.10.2ml去掉针头,将血淋巴注入1.5ml的灭菌离心管中,室温放置1h,放4℃冰箱过夜后,以4000rmp·min-1低温离心5min,吸取上清液,置于-20℃冰箱备用。免疫指标——超氧化物岐化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)和酸性磷酸酶(ACP)的测定按照南京建成的试剂盒说明书进行。

1.9 测试方法与计算指标

测量指标与方法:

亚硝酸盐氮的测定:N- (1-萘基) -乙二胺光度比色法。

氨氮的测定:萘氏试剂比色法(GB 7479 - 87)。

计算公式:

每百尾虾平均日增重=(每尾终均重-每尾初始均重)×100

饵料系数=摄食量/(终重-始重)

成活率=收获尾数/放养尾数×100%

1.10数据统计

采用SPSS11.5软件分析数据

2 试验结果

2.1蜘蛛酶对凡纳滨对虾成活率的影响

由图1可知,对照组、0.15%0.10%组的对虾平均成活率分别为82.33%89.67%90.67%0.15%0.10%浓度组比对照组的成活率提高7.34%和8.34%,,差异显著(P<0.05)。



1蜘蛛酶对凡纳滨对虾成活率的影响

2.2蜘蛛酶对凡纳滨对虾平均日增重和饵料系数的影响



2蜘蛛酶对凡纳滨对虾每百尾虾平均日增重的影响

由图2可知,对照组、0.15%0.10%组的每百尾对虾的平均日增重分别为8.98±1.11g10.32±0.78g9.96±0.49g0.15%0.10%组分别比对照组提高1.34g0.98g,且差异显著(P<0.05)。



3蜘蛛酶对凡纳滨对虾饵料系数的影响

3显示,对照组、0.15%0.10%组的饵料系数分别为1.52±0.101.35±0.081.47±0.150.15%0.10%组的饵料系数分别比对照组降低了0.17P<0.05)和0.05P>0.05),改善率达到11.18%和3.29%。

2.3蜘蛛酶对养殖水质指标的影响

2.3.1蜘蛛酶对养殖水体COD的影响

由图4可知,随着养殖时间的推进,养殖水体中的COD含量均有不同程度的提高,对照组比0.15%0.10%组的COD含量高,试验结束时,0.10%组的COD含量最低。

4蜘蛛酶对养殖水体COD的影响

2.3.2蜘蛛酶对养殖水体中氨氮的影响

由图5可知,随着养殖时间的推进,养殖水体中的氨氮含量均有不同程度的提高,对照组比0.15%0.10%组的氨氮含量高,0.15%0.10%组差异不明显,试验结束时,0.10%组的氨氮含量最低。

5 蜘蛛酶对养殖水体氨氮含量的影响

2.3.3蜘蛛酶对养殖水体中亚硝酸氮的影响

由图6可知,随着养殖时间的推进,养殖水体中的亚硝酸氮含量均有不同程度的提高,对照组比0.15%0.10%组的亚硝酸氮含量高,且0.15%0.10%组差异不明显,试验结束时,0.15%组的氨氮含量最低。

6 蜘蛛酶对养殖水体亚硝酸氮含量的影响

2.3.4蜘蛛酶对养殖水体中DOpH值的影响

试验期间,由于24h充氧,对照组、0.15%0.10%组水体中的DOpH值均在5.06.2mg/L7.47.9之间,变化不大。

2.4蜘蛛酶对南美白对虾非特异性免疫功能的影响

2.4.1对血清中酸性磷酸酶(ACP)的影响

在饲料中添加蜘蛛酶,各组血清中ACP活性的测定结果如表3所示。结果显示:0.15%0.10%与对照组之间存在显著差异P<0.05

2.4.2对血清中溶菌酶(LZM)的影响

在饲料中添加蜘蛛酶,各组血清中LZM活性的测定结果如表3所示。结果显示:只有0.10%组和对照组之间存在显著差异P<0.05

2.4.3对血清中超氧化物歧化酶(SOD)的影响

在饲料中添加蜘蛛酶,各组血清中SOD活性的测定结果如表3所示。结果显示:各实验组与对照组之间均不存在显著差异。

3. 对南美白对虾血清中ACPLZMSOD的影响

免疫指标

对照

0.10%

0.15%

ACP

4.12±0.63a

7.54±0.32 b

7.55±1.26b

LZM

10.26±3.11a

15.13±5.63b

14.06±2.54ab

SOD

114.36±7.08 a

113.70±9.86 a

115.63±5.68 a

3.小结

饲料中添加不同浓度的蜘蛛酶,经过60d的养殖试验,通过测定对虾的生长、成活率、饵料系数、水质指标,结果如下:

1)饲料中添加蜘蛛酶可以提高凡纳滨对虾的存活率,提高幅度达7.34-8.34个百分点;

2)饲料中添加蜘蛛酶还可以显著提高对虾的平均日增重、降低饵料系数,对饵料系数的改善率最高可达11.18%;

3)养殖期间,各组水体中COD、亚硝酸氮、氨氮都有不同程度的增加,但蜘蛛酶处理组的这三个指标增涨缓慢

4)在饲料中添加蜘蛛酶,可以提高凡纳滨对虾血清中ACP活性和LZM的活性,但对SOD活性影响不显著。

因此,综上所述,本次试验证明:在饲料中添加蜘蛛酶,可以显著提高凡纳滨对虾的成活率、平均日增重、饲料转化率以及非特异性免疫指标,减少虾体氮的排放量,从而改善水环境。


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